
PCR技術(shù)最突出的優(yōu)點是
[ ]
A.原理簡單
B.原料易找
C.TaqDNA聚合酶具有耐熱性
D.快速、高效、靈活、易于操作
PCR技術(shù)最突出的優(yōu)點是
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A.原理簡單
B.原料易找
C.TaqDNA聚合酶具有耐熱性
D.快速、高效、靈活、易于操作
D
考點名稱:多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增DNA片段
多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增DNA片段:
1、PCR原理:在解旋酶作用下,打開DNA雙鏈,每條DNA單鏈作為母鏈,以4中游離脫氧核苷酸為原料,合成子鏈,在引物作用下,DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈,即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物,其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。
2、PCR反應(yīng)過程是:變性→復(fù)性→延伸
3、結(jié)果:上述三步反應(yīng)完成后,一個DNA分子就變成了兩個DNA分子,隨著重復(fù)次數(shù)的增多,DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反應(yīng)過程都是在PCR擴增儀中完成的。
知識點撥:
1、DNA分子復(fù)制的人工控制
解開螺旋:在80~100℃時,DNA雙螺旋打開,形成兩條DNA單鏈,稱為變性。
恢復(fù)螺旋:在50~60℃左右時,兩條DNA單鏈重新形成雙螺旋結(jié)構(gòu),稱為復(fù)性。
復(fù)制條件:緩沖液,DNA模板、四種脫氧核苷酸、熱穩(wěn)定DNA聚合酶、兩種引物。
控制儀器:PCR儀(溫度周期性自動調(diào)節(jié)儀)。
2、PCR的含義是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。
3、PCR技術(shù)反應(yīng)的條件:①穩(wěn)定的緩沖溶液環(huán)境;②DNA模板;③合成引物;④四種脫氧核甘酸;⑤DNA聚合酶;⑥溫控設(shè)備
4、PCR技術(shù)最突出的優(yōu)點是快速、高效、靈活、易于操作。
5、TaqDNA聚合酶的特點是:耐高溫。
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