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清腦通竅中藥組方 清腦的中成藥篇一

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waters 2695高效液相色譜儀，2696pda檢測(cè)器，自動(dòng)進(jìn)樣；1100lc-msd-trap-xct/plus型液質(zhì)聯(lián)用儀 （美國(guó)agilent公司）；sartorious bt 25s型1/100000電子分析天平（北京賽多利斯儀器有限公司）；kq-500de型超聲波清洗器（昆山超聲儀器有限公司）；ql-901漩渦混和機(jī)（其林貝爾儀器制造公司）；臺(tái)式高速離心機(jī)（軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)儀器廠），勻漿機(jī)。

梔子苷，人參皂苷rg1，人參皂苷rb1及三七皂苷r1對(duì)照品均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所（批號(hào)分別為：110749-200309，110703-200322，110745-200312，110704-200318）；人參皂苷re，galioside，6α－h(huán)ydroxygeniposide，3,3',5,5'-四甲氧基-4,4'-二-β-d-葡萄糖雙環(huán)氧木脂素，6″－對(duì)香豆酰龍膽京尼平雙糖苷，藏紅花酸-1-葡萄糖（6-1）葡萄糖苷，京尼平龍膽雙糖苷，2α，3β，19α，23-四羥基齊墩果-12-烯-28-酸，人參皂苷rb2，rb3，rh1、rf，rc，rg2，rg3，rd及三七皂苷fa，r4，r7及 f2對(duì)照品由北京中醫(yī)藥大學(xué)石任兵教授課題組提供。

乙腈（fisher公司），色譜純；屈臣氏重蒸水（液相用水）；milli-q系統(tǒng)純化水（液質(zhì)用水）；肝素、水合氯醛及甲酸為分析純，均購(gòu)自北京北化精細(xì)化學(xué)品有限責(zé)任公司。cleanert c18 spe固相萃取柱（3 ml，200 mg，60 μm，北京艾杰爾科技有限公司）實(shí)驗(yàn)對(duì)象：sd大鼠：體重（300±10）g，雄鼠［北京市維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，許可證編號(hào)：scxk（京）2007－0001］。

2.1 給藥劑量及腦組織處理方法單劑量灌服清腦宣竅有效部位（6.0 g/kg）；灌服清腦宣竅有效部位后1 h取出大腦，吸干水分，精密稱重，加入腦重量?jī)杀扼w積的生理鹽水。以18 000 r/min勻漿，勻漿液加入兩倍體積的分析甲醇，渦旋振蕩10 min,混合液在6 000 r/min下離心20 min,取出上清液。殘?jiān)偌尤雰杀扼w積甲醇渦旋振蕩10 min, 6 000 r/min下離心20 min,兩次上清液混合，常溫減壓回收至干。殘?jiān)? ml液相水溶解，超聲振蕩，上spe固相萃取柱，先用水洗脫3 ml，再用甲醇洗脫2 ml，收集甲醇洗脫液，常溫減壓干燥，殘?jiān)蛹状?00 μl 漩渦溶解，即得供試品溶液。

2.2 hplc-ms條件色譜柱：

agilent eclipse xdb-c18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；保護(hù)柱：eclipse xdb-c18；柱溫：30℃；流速：1.0 ml /min；檢測(cè)波長(zhǎng)：203，238nm；乙腈（a）-酸水（b）二元梯度洗脫，梯度為：5%a17 min →16%a23 min →16%a28 min →20%a34 min →22%a50 min →30%a65 min →45%a80 min →100%a。1100lc-msd-trap-xct/plus型液質(zhì)聯(lián)用儀：質(zhì)譜（ms）條件：esi離子源；離子源溫度350℃；毛細(xì)管電壓：3 000 ev；負(fù)離子檢出模式；霧化氣壓力：60 psi；干燥氣：n2；流速：12 l/min；掃描范圍：200～1 800 m/z。

傳統(tǒng)中藥研究與現(xiàn)代分析技術(shù)手段結(jié)合，是中藥現(xiàn)代化的必須［7］。一個(gè)療效確切的復(fù)方進(jìn)入人體內(nèi)的成分譜中多數(shù)成分是否存在對(duì)疾病的`多靶點(diǎn)基因表達(dá)的調(diào)控作用，必須建立在確認(rèn)該成分（代謝產(chǎn)物）在靶器官內(nèi)是否存在的基礎(chǔ)上，再進(jìn)行體內(nèi)外藥效學(xué)研究。

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